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1、质粒救援转化是质粒转化枯草杆菌特有的方法。
2、在此转化中,质粒以单链形式进入感受态细胞的。
3、单体质粒DNA和感受态细胞接触时,在核酸酶作用下被切开,只有一条DNA链能够进入细胞。
4、这条链进入细胞后由于没有另外一条质粒DNA链迅速与其配对而被降解,所以没有转化活性。
5、寡聚型的质粒DNA分子在进入感受态细胞以后,线性DNA分子中的同源部分进行分子内的重组,并环化生成一个完整的质粒分子,不会被分解而有转化活性;质粒中如果具有与枯草杆菌同源的部分,质粒单链DNA进入感受态后可以与同源的片段配对形成双链,保护质粒。
6、所以可以通过:1构建寡聚型的质粒DNA分子(酶切后用连接酶连接);2在质粒中加入同源片段构建杂种质粒(质粒片段越大,转化效率越高。
7、当然是在一定限度内)。
8、这种转化方法称质粒救援转化。
9、参考资料:枯草芽孢杆菌中的分子克隆和单体杂种质粒转化的研究陈乃用等 应用于发酵工业的DNA重组技术 王贵宏等应用于基因筛选的穿梭质粒,弥补基因撞击或环境突变、提供基因剂量、促进基因操作,还可以应用于蛋白干扰分析。
10、质粒拯救我也不熟悉,只知道是反向遗传的一种方法。
11、具体的可以查看: 利用8质粒系统拯救A/Chicken/Shanghai/F/98(H9N2)株禽流感病毒 石火英 微生物学报 2005/03 这篇文章有具体的例子。
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